我国将早产定义为自末次月经第1日开始在孕28周至不满37周间终止妊娠者，其发病率为5%～15%^[1]。尽管围生医学水平在不断提高，早产仍为导致新生儿死亡和患病的首要原因。早产与激素、感染、免疫、遗传及环境等多种因素相关^[2]。虽然其确切的发病机制尚未阐明，但有研究提示炎症因素在早产的发生中起重要作用。有研究报道，炎症因子IL-17在感染引起的早产病例中显著增加，然而IL-17是否参与促进激素诱导的早产发生目前未见报道^[3]。本研究通过建立米非司酮诱导的早产大鼠模型，对比IL-17在早产组和对照组外周血中水平的差异，探讨炎症因子IL-17可能在激素诱导的早产中的作用。

SPF级Sprague-Dawley大鼠(10~12周龄，200~400 g)，购于广东省实验动物中心，自由摄食及饮水，光照时间为上午6点至下午6点，室温23~26 ℃，相对湿度30%~80%，定期紫外线消毒，通风良好。本研究经广州医科大学伦理委员会批准。

参照Garfield等^[4]的方法建立动物模型：经过隔离检疫并适应性喂养1周后按雌雄小鼠4∶1合笼，次晨行阴道涂片，镜检发现精子者标记为妊娠第1日。将8只孕鼠按随机数字表法分为对照组与早产组，每组4只。在妊娠第18日，早产组予经皮下注射米非司酮10 mg/kg(预溶于0.3 ml芝麻油)；对照组大鼠在相同时间点注射等体积的芝麻油。

SD大鼠在妊娠第18日经皮下注射米非司酮或芝麻油6 h和24 h后，分别从眼眶取血约0.5 ml，离心后取上层血清，采用液相芯片法(eBioscience)检测血清中IL-17、GM-CSF的水平。测定完全按照试剂盒说明书进行：准备相应的标准品S1-S8及检测样品；预混抗体微球并加入96孔板，每孔50 μl，洗涤孔板2次；加入25 μl 分析缓冲液至96孔板，然后加入25 μl 标准品及25 μl 血清样本至对应含抗体微球的96孔板中，封板膜密封孔板，避光室温500 rpm振荡孵育2 h；洗涤孔板3次，稀释探测抗体并向每孔加入25 μl，封板膜密封孔板，避光室温500 转/分振荡孵育30 min；洗涤孔板3次，每孔加入50 μl SA-PE溶液，封板膜密封孔板，避光室温500转/分振荡孵育30 min；洗涤孔板3次，加入120 μl 上机液重悬微球，500转/分震荡5 min后上机读数，根据标准曲线计算出样本中IL-17及GM-CSF的水平。

应用SPSS 19.0 统计软件进行数据分析，计量资料用±s表示，组内2个时间点间比较采用配对t检验，组间比较采用成组设计t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2组大鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05) ，早产组大鼠在妊娠第18日皮下注射米非司酮后的发动分娩时间间隔短于皮下注射芝麻油的对照组(P＜0.01) ，见表 1。2组大鼠均无发生其他并发症。

表 1

表 1 早产组与对照组大鼠体质量、分娩发动时间间隔比较(x±s) 组别 例数 大鼠体质量(g) 分娩发动时间间隔(h) 早产组 4 352±26 24.4±0.5 对照组 4 346±24 97.8±0.8 t值 0.343 76.456 P值 0.743 ＜0.001

表 1 早产组与对照组大鼠体质量、分娩发动时间间隔比较(x±s)

早产组大鼠在皮下注射后6 h与24 h的血清IL-17水平比较差异有统计学意义(P＜0.01) ，2个时间点间血清GM-CSF水平比较差异无统计学意义(P>0.05) 。皮下注射后6 h，早产组大鼠在血清IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05) ；皮下注射后24 h，早产组大鼠血清IL-17水平高于对照组(P＜0.01) ；早产组大鼠在皮下注射后6 h与24 h的血清GM-CSF水平与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05) ，见表 2及图 1。

表 2

表 2 早产组与对照组大鼠血清IL-17、GM-CSF水平比较(x±s)ng/L 组别 例数 IL-17 t值 P值 GM-CSF t值 P值 6 h 24 h 6 h 24 h 早产组 4 0.43±0.13 1.14±0.12 4.145 0.006 0.77±0.11 0.62±0.07 0.277 0.791 对照组 4 0.56±0.21 0.31±0.09 2.188 0.071 0.64±0.06 0.68±0.16 0.468 0.656 t值 1.05 11.01 2.08 0.69 P值 0.333 ＜0.001 0.083 0.518

表 2 早产组与对照组大鼠血清IL-17、GM-CSF水平比较(x±s)ng/L

图 1

图 1 早产组与对照组大鼠血清IL-17、GM-CSF水平变化及比较

在全球范围内，早产的发病率达5%~18%，每年有上百万的新生儿死于早产相关的并发症，早产是导致围生儿患病和死亡的最常见原因^[5]。目前已知的早产高危因素包括下生殖道感染、胎膜早破、子宫膨胀过度及妊娠合并症等。然而，越来越多的研究表明，无论是否存在感染，炎症反应在早产的发病中均起着至关重要的作用^[2]。

早产是一个由免疫系统与神经系统、内分泌系统共同参与的过程。在此过程中，炎症细胞包括中性粒细胞、巨噬细胞和其他淋巴细胞集聚在母胎界面，产生大量的细胞因子及趋化因子，进而募集更多的炎症细胞并促使前列腺素和蛋白酶水平增高，引起子宫收缩、宫颈成熟扩张及胎膜早破^[2]。

IL-17作为一种重要的炎性介质，主要由辅助性T细胞17(Th17) 细胞、γδ T 细胞及自然杀伤细胞等多种固有免疫细胞产生。IL-17能诱导多种 炎症细胞因子、急性期反应蛋白和趋化因子MCP-1、MIP-2等表达，促进嗜中性粒细胞的增殖、成熟和趋化，还能上调组织细胞黏附分子-1的表达，介导炎症细胞和T 细胞在组织中的浸润，并与其他炎症细胞因子发挥协同效应，促进T 细胞的活化并协助B 细胞产生抗体，放大靶器官的免疫反应及炎症性破坏，从而参与多种感染、自身免疫性疾病的发病^[6-7]。

多项研究结果提示，IL-17在复发性流产的发生中起重要作用^[8-10]。但其与早产的关系鲜见报道。Fu等^[10]报道了IL-17在感染性早产中具有进一步诱导炎症的作用，然而对其是否在激素诱导的早产中起作用笔者尚未见报道。故本研究选择米非司酮诱导的早产大鼠模型，比较其与正常妊娠大鼠外周血中IL-17、GM-CSF的水平。结果发现，早产组大鼠在皮下注射米非司酮 24 h后血清IL-17的水平较6 h时升高；在注射后6 h时，早产组血清IL-17水平与对照组相近，24 h 时早产组血清IL-17水平高于对照组，而GM-CSF在2组间比较差异均无统计学意义。结果提示，炎症因子IL-17可能参与促进了激素诱导的早产的发生，然而升高的IL-17主要由哪种细胞产生及其具体分子作用机制尚有待进一步的探讨。本研究也从另一角度说明早产是多种因素(包括激素、炎症因子等)相互作用的过程，而多学科人员的共同努力将为早产的防治提供新的思路及选择。